蜂王在空中交配。無人機飛出它們的殖民地並聚集在一個叫做無人機聚集區的地方。處女皇后似乎知道這些區域在哪裡，並在那裡做一個“蜜蜂線”以便交配。在這個區域，許多無人機與處女交配，然後死亡。
處女女王將在幾天或一周內進行一次或多次交配。然後她就完成了一生的交配。精子（來自雄蜂）儲存在蜂王腹部的一個特殊的小球中，稱為受精囊。只要蜂王保持生產力，它就會提供營養以保持精子的活力。
由於蜂后與許多雄蜂交配，蜜蜂群是“亞科”的集合。蜂群中的所有蜜蜂都有同一個母親（蜂王）；但有些工人將是全姐妹（有相同的母親和父親），有些將是半姐妹（有相同的母親但不同的父親）。這種遺傳多樣性對於擁有有助於蜜蜂生存的各種特徵的繁榮、健康的蜂群至關重要。
如果由於某種原因阻止處女交配，那麼她將停止嘗試交配並開始產卵。然而，這些卵都不會受精，因此它們都會產生無人機。
處女女王需要幾天的時間才能成熟——她的翅膀會膨脹並變乾，她的腺體會成熟，等等。然後再過幾天飛行和交配，再過幾天安定下來產卵。從出現到開始產卵需要兩到三週的時間。